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更新时间:2017-01-09
厂商性质:经销商
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TSC22敲除的人结直肠腺癌细胞;HCT116-Cas9-TSC22KO-569说明书现货直销,免费快递送货上门。公司供应各种细胞株,细胞系,种类齐全,现货,质量保证,公司所有产品仅供科研使用,不得用于医学诊断。使用前仔细阅读本说明书。
产品名称 | TSC22敲除的人结直肠腺癌细胞;HCT116-Cas9-TSC22KO-569说明书 |
用途 | 仅用科研 |
保存条件 | 4℃保存一年;-20℃长期保存 |
细胞名称
形态特性 上皮样;多角
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞是利用Crispr/Cas9技术敲除了HCT116的部分TSC22基因,Western Blotting检测发现该克隆无TSC22蛋白表达。
培养条件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS;2ug/ml Puromycin
传代方法 1:3传代;3~4天1次。
传代情况 C3
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法(-)
STR Amelogenin:x,x;CSF1PO:7,10;D12S391:17,22;D13S317:10,12;D16S539:11,13;D18S51:16,17;D19S433:12,13;D21S11:29,30;D2S1338:16,16;D3S1358:12,19;D5S818:10,11;D6S1043:13,13;D7S820:11,12;D8S1179:11,14;FGA:18,23;Penta E:13,13;TH01:8,9;TPOX:8,8;vWA:17,22;
同工酶
染色体
使用权限 A类
运输保存:
采用干冰保存运输。收到细胞时,若干冰已经*融化,请立即将细胞复苏培养;若尚留有干冰,请立即将细胞放入液氮中保存待用,请按条件贮存细胞,切不可将细胞置于高温环境。
保存条件:4℃保存一年;-20℃长期保存
用途:只可用于科研。
储存:液氮。
运输:干冰(第二代培养末期液氮冻存)。
细胞一般2-3天更换一次培养基,这取决于细胞生长的速度。许多细胞培养实验室通常在周一,周三,周五更换培养基。
注意:*次植入后,在6-16小时内更换培养基,以去除残留的二甲基亚枫和死亡细胞。到达客户手中,出现任何问题(人为或者非人为),导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。对于细胞的真实性,支持客户检测对应的biomarker,(如证明细胞错误,全额退款。)公司针对每株细胞,鉴定gene background,鉴定完成的细胞可以提供数据,用于证明细胞的真实性,并且帮助客户更多的了解细胞特性。
操作步骤:
1. 将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片,待细胞长至80%时取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室温孵育爬片20min,使细胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻断内源性过氧化物酶,室温孵育15min(一般用甲醇或蒸馏水稀释30%过氧化氢),PBS冲洗3次,每次3min。
5. 封闭血清室温孵育20min,PBS冲洗3次,每次3min。
6. 细胞特异性一抗孵育:按照抗体说明书稀释比例稀释好一抗,滴加在爬片上,于4°C湿盒中孵育一夜,PBS冲洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:选与一抗对应的二抗,按比例稀释后滴加在爬片上,37°C湿盒中孵育30min,PBS冲洗3次,每次3min。
8. 将爬片周围水渍吸干,爬片上滴加新鲜配制的DAB显色液,显微镜下观察,当出现棕黄色或棕褐色的阳性信号时用蒸馏水冲洗终止显色。
9. 复染:用Harris苏木素复染30s~1min,水洗后用1%的盐酸酒精分化,再用蒸馏水(或PBS)水洗返蓝。
10. 封片:将中性树胶滴在爬片一侧,再用盖玻片盖上,先放平盖玻片一侧再轻轻放下另一侧,以免产生气泡,封好的爬片平放置于通风厨中晾干。
11. 镜检观察。Calcein M 100mg
DNA Sarkosyl 溶液,10%100mL
22-0140-12Cyanine 3-NHS Ester12x50nm
17- μL RNase-free 蓝吸头 ( 袋装 )1000 支
平滑肌细胞生长因子 ( 不含血清 )5mL
百万碱基细菌 (G+)DNAout10 次
SNP(NO 供体 )1g
T7 RNA 聚合酶25000U
23-0720-2Sodium orthovanadate( 磷酸酯酶抑制剂 )2g
101101-30线状 DNA 清除剂30 次
RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5100mL
超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒(ECL)25mL
红细胞裂解液 A 型 ( 核酸纯化 ) 100mLNCI-H838(人非小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
Citrate Buffer(100x)/柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100x)100ml国产
NZYM琼脂/NZYM AgarBR100克国产/进口
糖蛋白胨培养液/糖蛋白胨肉汤/Lactose Peptone Broth饮用水中总大肠菌群多管发酵法检验250克国产/进口
801-D (人巨细胞性肺细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠淋巴管内细胞*培养基100mL
人结肠细胞英文名称:LS174T
V5标签免疫亲和介质125ul国产
Lysozyme Antibody/溶菌酶100mg国产
A-427(人肺细胞)5×106cells/瓶×2
动力-吲哚-尿素培养基基础/MIU培养基基础/MIU Medium Base细菌的复合生化试验250克国产/进口
胰蛋白示/示蛋白胨/月示蛋白胨/月示胨/蛋白示/TryptoseBR250/500克国产/进口
J82(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×2
食管鳞英文名称:KYSE150
可视型中分子量蛋白Marker50次国产
Saos-2,人成骨肉瘤细胞
Hela, 人宫颈细胞系
42℃生长培养基/42℃ Growth Medium副溶血弧菌42℃生长试验250克国产/进口
链球菌培养基1万毫升/袋国产/进口
MDA-MB-175VII(人腺导管细胞)5×106cells/瓶×2
猪肾细胞英文名称:PK(15)
人肾细胞英文名称:OS-RC-2
链脲佐菌素溶液 ,10mg/mL10mL
18-0090-50GSH 试剂盒 ( 谷胱甘肽测试盒 )( 比色法 )50 T
101206-100DNA Tris HCl,1M,pH8.0100mL
SSPE 溶液 ,20×100mL
DNA 电泳分子量标准 (100-200 bp)50 次
绿如蓝染料,PCR 1mL