Cas9稳定表达的人食管癌细胞；EC109-Cas9-570价格售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员，我们将尽快为您解决。

Cas9稳定表达的人食管癌细胞；EC109-Cas9-570价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

Cas9稳定表达的人食管癌细胞；EC109-Cas9-570价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞是采用慢病毒感染的方式使EC109细胞稳定表达Cas9-Flag-Neo，经400ug/mlG418筛选得到的单克隆，经Western Blotting验证该克隆可以表达Cas9蛋白，可直接用Crispr技术编辑基因组DNA。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；400ug/ml G418
传代方法  1:3传代；2~3天1次。
传代情况 C3
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR  Amelogenin：x,x；CSF1PO：10,10；D12S391：19,20；D13S317：11,11；D16S539：12,12；D18S51：12,16；D19S433：13,13；D21S11：30,30；D2S1338：17,20；D3S1358：17,17；D5S818：12,12；D6S1043：13,13；D7S820：8,12；D8S1179：13,14；；FGA：25,25；Penta E：16,16；TH01：9,9；TPOX：8,8；vWA：16,17；
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

Origami(DE3) 菌种1mL
51206-5000Taq DNA 聚合酶5000U
120668J-14mL DNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个
苏丹 B5g
大提柱式细菌 RNAout5次
酵母化学感受态细胞制备试剂盒20 次
Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10
17-0240XbaI1500U
131165-104× 核酸液相杂交液10mL
糖蛋白 PAGE 染液1套
多粘菌素 B 硫100mg
动植物总蛋白微量提取试剂盒50 次
G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25 OD
60908质粒（载体）列表2 μg
130832-20天净沙通用型MLPA 试剂盒20 次
无内毒素枪头，200 μL1盒
GSH( 抗氧化剂 )1g大鼠肾动脉内细胞*培养基100mL
NCTC 1469(小鼠正常肝细胞)5×106cells/瓶×2gersion
CNE-2Z(人鼻咽细胞)5×106cells/瓶×2
吴茱萸次碱规格： 20mg/支；98%
MCP琼脂/产气荚膜梭菌琼脂/MCP Agar产气荚膜梭菌的计数和培养250克国产/进口
人大细胞肺细胞英文名称：NCI-H661
匹克氏肉汤基础/匹克氏肉汤基础A/Picks Broth Base/Pick，s Broth Base A溶血性链球菌的增菌培养250克国产/进口
SW-13(人肾上腺质细胞)5×106cells/瓶×2
FO(小鼠骨髓瘤细胞)5×106cells/瓶×2
HBZY-1(大鼠肾小球系膜细胞)5×106cells/瓶×2
人腺细胞英文名称：Hs 578T
鹅去氧胆酸/CDCABR，98%5/25/100克国产/进口
MDA-MB-436(人腺细胞)5×106cells/瓶×2
5637(人膀胱细胞)5×106cells/瓶×2
人肾动脉内细胞*培养基100mL
大鼠肾管状上细胞*培养基100mL
CTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纤维5×106cells/瓶×2gersion
CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株)5×106cells/瓶×2
NTM培养基/NTM Medium淋球菌的分离培养250克国产/进口
多粘菌素 B 硫100mg
两管式 RT-PCR 试剂盒 (AMV-Taq)50 次
CAS57-09-0十六烷基*基溴化铵25g
140382-10AGL1 农杆菌感受态细胞10×100μL