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人肺癌细胞(大细胞肺癌)；NCI-H460图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人肺癌细胞(大细胞肺癌)；NCI-H460图片
形态特性  上皮样
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞p53 mRNA阳性，致瘤性阳性。 
培养条件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
传代方法  1:3~1:8，每周换液2次
传代情况 P18
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 培养法（-）
STR 
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
人肺癌细胞(大细胞肺癌)；NCI-H460图片细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
人肺癌细胞(大细胞肺癌)；NCI-H460图片质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人肺癌细胞(大细胞肺癌)；NCI-H460图片操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )5L
Okadaic acid 盐 (PP1 和 PP2A 抑制剂 )10μg
凝血酶1000U
T4 RNA 连接酶1000U
51208B-5dNTP 溶液 ,10mM5mL
胶原酶Ⅰ型100mg
卵巢上皮细胞生长因子5mL
CAS7240-90-65- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
CAS8002-43-5卵磷脂 ( 蛋黄 )10g
90613-25动物细胞核蛋白微量制备试剂盒25 次
尿苷 -5'- 二磷酸25mg
柱式粪便 DNAout50 次
CAS9007-34-5胶原蛋白Ⅰ型1g
柱式藻类 RNAout50 次
粪便 DNAout100 次
DNA 稀释液10mLHEL(人红白细胞白血病细胞)5×106cells/瓶×2
5%糖发酵管BR20支国产/进口
硫柠胆蔗琼脂培养基/TCBS琼脂/TCBS Agar用于霍乱、副溶弧菌的分离培养250克国产/进口
LLC-WRC 256(大鼠腹水细胞)5×106cells/瓶×2
中性蛋白酶(含10mL酶解缓冲液)1mL
胎儿真成纤维细胞*培养基100mL
MKTTN肉汤/MKTTN Broth食品中沙门氏菌检验选择性增菌250克国产/进口
人成骨肉瘤细胞英文名称：MG-63
葡萄糖铵发酵管BR20支国产/进口
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC试剂盒3ml、18ml国产
Calu-6(人肺退行性细胞)5×106cells/瓶×2
Jurkat全细胞裂解液100μg国产
RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞gersion
改良CAMP-BAP氏琼脂基础/改良CAMP-BAP氏培养基基础/CAMP-BAP Agar Base Modified弯曲杆菌选择性分离培养250克国产/进口
大鼠神经小胶质细胞*培养基100mL
S180/小鼠腹水瘤株国产
Hela S3(人宫颈细胞)5×106cells/瓶×2
4-甲基伞形酮葡糖苷酸培养基(配套靛基质)/MUG培养基/MUG-Medium（with Kovacs）大肠埃希氏菌快速荧光测定培养基20g+靛基质20m国产/进口
亮绿糖培养基/Brilliant Green Lactose Medium饮用天然矿泉水中大肠杆菌检验250克国产/进口
MCF 7B(人腺细胞)5×106cells/瓶×2
人肺癌细胞(大细胞肺癌)；NCI-H460图片中性红染色液(活细胞染色用)规格：100ml
聚乙二醇 8000250g
CAS76-05-1三氟100mL
130951-10Southern 细菌 (G+)DNAout10 次
EcoRV1500U
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根过氧化物酶标记100μL