人子宫颈癌；C-33 A价格售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员，我们将尽快为您解决。

人子宫颈癌；C-33 A价格质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。

人子宫颈癌；C-33 A价格操作步骤：

1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性  上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  C-33 A 细胞株是N. Auersperg从宫颈癌切片中建立的一系列细胞株(参见ATCC CRL-1594和ATCC CRL-1595)中的一株。 细胞一开始就表现出亚二倍体核型及上皮细胞形态。 连续传代可以观察到核型不稳定。 存在成视网膜细胞瘤蛋白(pRB)，但大小不正常。 P53表达上调，且有一个273位密码子的点突变导致Arg -> Cys的替换。 人乳头瘤病毒DNA及RNA阴性。 
培养条件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  优质胎牛血清，10%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(98+5)
冻存条件  *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:12；D13S317:13；D16S539:13,14；D18S51:15,18；D19S433:11,13,14；D21S11:29,30,31；D2S1338:23,25；D3S1358:16；D5S818:11,12；D7S820:10；D8S1179:10,14；FGA:21,26；TH01:7,8；TPOX:9；vWA:18,20
同工酶 
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。

Rosetta(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10
80910-10X-Gal 溶液，20mg/mL10mL
柱式软体 RNAout50 次
一管式病毒 DNAout50 次
地塞米松100mg
酪蛋白溶液 (PBS)100mL
140646-100鲁米诺血迹鉴定试剂盒100mL
SP6 RNA 聚合酶5000U
莽草酸10mg
高效农杆菌感受态细胞制备试剂盒20 次
丁基硫介质50mL
18-0540-120酸性磷酸酶检测试剂盒120 次 
细菌总蛋白质微量提取试剂盒30 次
卵白蛋白1g
植物线粒体纯化试剂盒 ( 精提 )5次
131001-10AP 标记的抗地高抗体10μL
Red-Taq DNA 聚合酶100U1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一碳-7-6674-22-2
3-(Bromomethyl)-5-chlorobenzo[b]thiophene3-溴基-5-并噻吩1198-51-2
4-Aminobenzaldehyde对氨基556-18-3
Cynaroside木犀草苷5373/11/5
1-BUTYL-2,3-DIMETHYLIMIDAZOLIUM HEXAFLUOROPHOSPHATE1-丁基-2,3-二基咪唑六磷酸227617-70-1
Solvent Red 27油红O1320-06-5
4,4'-Diiodobiphenyl4,4-二碘联3001-15-8
SECOISOLARICIRESINOL开环异落叶松树脂酚29388-59-8
2-Pyridinecarboxaldehyde吡啶-2-1121-60-4
Allyl chloroformate酸丙酯2937-50-0
Stannous sulfate硫酸亚锡7488-55-3
SODIUM NITRATE-15N酸-15N31432-45-8
p-Nitrophenylacetonitrile对基乙555-21-5
Potassium tert-butanolate叔丁醇钾865-47-4
o-Phenanthroline monohydrochloride monohydrate邻菲罗啉酸3829-86-5
Cyclohexanecarboxylic acid chloride环己酰2719-27-9
N-BenzoylcytidineN-酰胞苷13089-48-0
7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin7-乙基-10-羟基喜树86639-52-3
Adenosine腺嘌呤核苷58-61-7
2-Iodoaniline2-碘胺615-43-0
MMLV 逆转录酶 (H-)1000U
博莱溶液 ,10mg/mL1mL
小鼠抗 T7 标签单抗100μL
131234-1地塞米松溶液 ,50mg/mL1mL
NAO 25mg
非酶 DNA 清除剂 -215 次