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更新时间:2025-06-26
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人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3图片
形态特性 上皮细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 SK-OV-3由G.Trempe和L.J.Old在1973年从卵巢肿瘤病人的腹水分离得到。 此细胞对肿瘤坏死因子和几种细胞毒性药物包括白喉毒素、顺铂和阿霉素均耐受。 在裸鼠中致瘤,且形成与卵巢原位癌*的中度分化的腺癌。
培养条件 McCoy's 5A Media (Modified with Tricine) 优质胎牛血清,10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(25+5)
冻存条件 *培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:8,11;D16S539:12;D18S51:16,17,18;D19S433:14,14.2;D21S11:30,31.2;D2S1338:18,23;D3S1358:14;D5S818:11;D7S820:13,14;D8S1179:14,15;FGA:24,25;TH01:9,9.3;TPOX:8,11;vWA:17,18
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
80908-25一站式动物 mRNAout25 次
DNA 非变性 PAGE 上样液10mL
柱式血液 mtDNAout,测序10 次
100868-500SDS-PAGE 分离胶配胶液500mL
RNA 电泳液 ,10×100mL
克必隆 eTS miRNA cDNA 文库构建试剂盒1套
鲑鱼精 DNA 溶液1mL
Caspase 8 检测试剂盒 50 次
120892-200大鼠内皮细胞分离液 1.066200mL
天净沙核酸浓缩剂30mL
交联琼脂糖凝胶 4B100mL
EDTA 溶液 ,0.5M, 蛋白10mL
D020-1PCR- 单链构象多态性检测技术服务一块胶
18-0660-50抑制与产生超氧阴离子自由基测试盒 ( 比色法 )50 T
荧光素50g
96 孔板 PCR 片段纯化回收试剂盒 ( 离心法 )5次
SURE 菌种1mL
12-284AG1 菌种1mL
硫脲25g
阿尔玛蓝细胞增殖与细胞毒检测试剂500 次
乳酸过氧化物酶10mg
酵母 DNAout50 次4-PYRAZOLECARBOXYLIC ACID1H-吡唑-4-酸37718-11-9
4,6-BIS(DIPHENYLPHOSPHINO)PHENOXAZINE4,6-二(二基膦)吩嗪261733-18-0
4-Bromomandelic acid4-溴扁桃酸6940-50-7
Trimethylsulfonium iodide三基碘化锍2181-42-2
3-Chloro-2-fluorobenzenethiol3--2-硫酚1121585-29-2
Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside异丙基-beta-D-硫代半乳糖吡喃糖苷367-93-1
N,N-DimethylethanolamineN,N-二基乙醇胺108-01-0
DIASTASE淀粉酶9000-92-4
(2-Chloro-3-pyridinyl)methanol2--3-吡啶醇42330-59-6
3-Hydroxy-4-methoxybenzonitrile3-羟基-4-氧基52805-46-6
Aminopyrazine氨基吡嗪5049-61-6
Valeryl chloride正酰638-29-9
NADE23 纤维素
1,3-Dioxan-5-ol甘油缩86687-05-0
Fmoc-N-methyl-L-aspartic acid 4-tert-butyl esterFmoc-N-基-L-天冬氨酸 4-叔丁酯152548-66-8
1-Adamantanemetha-金刚烷醇770-71-8
N-AcetylcaprolactamN-乙酰己内酰胺1888-91-1
5-BROMO-2-METHYLBENZENESULFONYL CHLORIDE5-溴-2-基磺
111203-250绿如蓝蛋白染液250 次