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更新时间:2025-06-26
厂商性质:经销商
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人成巨核细胞白血病细胞;MEG-01图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人成巨核细胞白血病细胞;MEG-01图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 MEG-01细胞株源自一位CML患者成巨核细胞转换期的骨髓细胞。 细胞质因子VIII和表面球蛋白IIb/IIIa,高碘酸-Schiff(PAS)反应,α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶阳性。 髓过氧化物酶,α丁酸萘酯酶,氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和碱性磷酸酶阴性。 用单克隆抗体BA-1(抗B细胞,粒性白细胞),HPL-3(抗球蛋白IIb/IIIa)和20.3(抗单核细胞,血小板)染色成阳性。 其他淋巴和骨髓类抗体成阴性。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 优质胎牛血清,10%
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
一管式病毒 RNAout50 次
120507-25Xa 因子蛋白酶25μg
遗传100mg
4mL DNA 离心超滤管 (30-50 KD)1个
X33 酵母菌种1mL
CAS58-58-2嘌呤盐酸盐25mg
CAS3483-12-3二硫苏糖醇 (DTT)5g
81028-25一站式植物 mRNAout25 次
DNA CTAB 溶液,20%100mL
Southern 细菌 (G-)DNAout10 次
81203-20SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L
RNA DEPC ( 焦碳酸二乙酯 )10mL
动物上皮细胞生长因子5mL
D/F12 培养基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
鲁米诺血迹鉴定试剂盒100mL
120895-200大鼠白细胞分离液 1.084200mL
天净沙细胞蛋白质 -RNA 双提取试剂盒 50 次
交联琼脂糖凝胶 6B100mL
嘌呤干粉25mg
23-0240-100Etoposide( *泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
81224-100BCIP/NBT 显色试剂盒100mL
油红 O5gBenzene in Toluene气相色谱仪检定用标准物质(-溶液)
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂26305-03-3
5-Acetylamido-2-chloroaniline3-氨基-4-乙酰胺51867-83-5
101 White support101白色担体
Sodium gluconateD-葡萄糖酸527-07-1
N-BOC-ETHYLENEDIAMINE HYDROCHLORIDEN-BOC-乙酸79513-35-2
Homophthalic acid邻羧基乙酸89-51-0
6-Aminopyridine-3-carboxamide6-氨基烟酰胺329-89-5
Basic protease性蛋白酶
2'-Chloroacetophenone邻乙2142-68-9
N-NITROSO-DI-ISO-PROPYLAMINEN-亚基二异丙胺601-77-4
3-Indolepropionic acid吲哚-3-丙酸830-96-6
6-Nitroindole6-基吲哚4769-96-4
2-BROMO-5-IODOBENZOIC ACID2-溴-5-碘酸25252-00-0
2,2'-THENOIN2-羟基-1,2-二(2-噻吩基)乙烷-1-27761-02-0
Methyl L-tyrosina-酪氨酸酯1080-06-4
1,1-Bis(hydroxymethyl)cyclopropane1,1-环丙烷二醇39590-81-3
4-Chloroindole4-吲哚25235-85-2
N-(3-chloropropyl)dibutylamineN-(3-丙基)二正丁胺36421-15-5
96 孔板病毒 DNAout( 真空法 )1次