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更新时间:2025-06-26
厂商性质:经销商
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人急性早幼粒白血病细胞;HL-60价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
人急性早幼粒白血病细胞;HL-60价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 该细胞由Collins SJ从一位患有急性早幼粒细胞性白血病的36岁白人女性的外周血中分离建立;可自发分化,或在丁酸盐、次黄嘌呤、佛波醇肉豆蔻酸(PMA,TPA)、DMSO(1% to 1.5%)、放线菌素D和视黄酸的刺激下发生分化;PMA刺激后可分泌TNF-α。该细胞具有吞噬活性和趋化反应,癌基因myc阳性,表达补体受体和FcR(来源于药物所)。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C49
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶 同工酶鉴定
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%*培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
P004-1蛋白质表达与纯化技术服务一个蛋白
131218-2GTP 溶液,2.5mM2mL
无机焦磷酸酶,热稳定250U
GS200 酵母菌种1mL
制霉菌素100mg
dCTP 溶液,100mM0.5mL
CAS528-50-7纤维素 DE-52100g
121112-10Stbl3 感受态细胞0.1 mL×10
心肌黄酶1KU
核苷酸类似物法易错 PCR 试剂盒15 次
亚精胺三盐酸盐1g
脱氧胆酸5g
CAS26177-86-6D- 果糖 -6- 磷酸二100mg
100885-0.5X-Gal 干粉0.5g
一站式磁珠法全血 mRNA 提取试剂盒50 次
间充质干细胞成骨细胞分化生长因子5mL
α- 乳糖100g
Ficoll-Paque 介质100mL
CAS145224-94-82-(N- 吗啡啉 ) 乙磺酸10g
100202-100兔抗 His 标签多抗,HRP 标记100μL
真菌种属鉴定 PCR Mix 7100 次
克必隆平末端克隆试剂盒(组成型)20 次
赤霉素250mg
Forskolin( 苷酸环化酶激活剂 )1mg
陶瓷研钵 ( 直径 75 mm)1个
131031-100人基因组 DNA,男性100μg
100930B-1硝酸纤维素膜,13×20cm1张
Tricine-SDS-PAGE 配胶液1000mL真菌总蛋白质微量提取试剂盒50 次
CAS1772-03-8D- 氨基半乳糖盐酸盐250mg
101122-1尼龙膜,13×20cm1张
60608-100固相内毒素清除剂100g
TB1 菌种1mL
纤维素 DE-52100g
CAS66676-43-5金黄色葡萄菌 V8 蛋白酶1mg
101204-100DNA Tris HCl,1M,pH7.0100mL
GSH 和 GSSG 试剂盒共 100 次
BL21-CodonPlus(DE3) 感受态细胞10×100μL
PLPD 固定液250 mL
柱式鼠尾 DNAout50 次
60107-20DNA 粘转平试剂盒20 次
lambda(λ)DNA5μg
PMA/TPA (PKC 激活剂 )1mg
17-0160NotI150U
一站式 Tricine-SDS-PAGE 套装30 次
TMB 法地高杂交试剂盒5次
青霉素 G 盐1g
SURE 化学感受态细胞0.1mL×10
CAS9045-22-1肝素锂1g
120504-5大提柱式藻类 RNAout5次
DMEM 培养基 ( 高糖,含 10% 胎牛血清 )100mL