人肝癌细胞；BEl-7402图片售后：收到细胞后7天，如发现细胞有质量问题（如污染，死亡，快递运输等原因）时，应出具书面质量问题报告并及时传真致销售人员，我们将尽快为您解决。

人肝癌细胞；BEl-7402图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和治疗。
细胞名称 人肝癌细胞；BEl-7402图片
形态特性  上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  BEL-7402细胞株是1974年从临床肝癌手术标本中建立的。 细胞群体倍增时间为20小时。 移植到处理过的wistar大鼠中的能形成肿瘤结节。 细胞形态呈上皮样细胞。 在电子显微镜下亦显示上皮细胞所具有的桥粒和张力原纤维，与临床肝癌细胞相似。 分瓶培养第四天时，其有丝分裂指数约为7%。 BEL-7402细胞的染色体数为不足三倍体，有一个异常的近端着丝点染色体。 间接免疫荧光法测BEL-7402细胞内的AFP为阳性反应。 LDH同工酶谱显示与成年人肝细胞不同，而与人胚肝及临床肝癌相近。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C261
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类
细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%*培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

嘌呤硫酸盐5g
miRNA 荧光定量检测试剂盒25 次
CAS75-12-7去离子甲酰胺100mL
130681-0.83通用 miRNA 克隆接头0.83nmol
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次
甲基绿1g
异硫氰酸胍25g
色素细胞生长因子5mL
DNA  SDS( 十二烷基硫酸 )100g
140626-20细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-APC）20 次
90101-50大片段 DNA 分子量标准50μg
嗜热菌蛋白酶25mg
动物细胞裂解液 B50mL
四硼酸，十水100g
人基因组 DNA，男性100μg
CAS110-16-7马来酸100g
100833-5PMSF 溶液，10mg/mL5mL
柱式软骨 RNAout50 次
麦芽浸粉250g
ATP 依赖的 DNase200UDAF-FM DA(NO 荧光探针 )100 次
90501-250Tth DNA 聚合酶250U
胸嘧啶5g
植物血球凝集素 P5mg
4’,6- 二脒基 -2- 苯基吲哚二盐酸盐10mg
大提柱式血液 RNAout5次
CAS9004-54-0葡聚糖 T-50010g
α- 氰基 -4- 羟基肉桂酸10g
超敏化学发光 (HRP) 检测试剂盒（ECL）25mL
G(5′)ppp(5′)G 帽结构类似物25 OD
120101-2谷胱甘肽琼脂糖2mL
140625-20双染细胞凋亡检测试剂盒（Annexin V-APC·7-AAD） 20 次
19-0060-100 F12 培养基 ( 含 10% 胎牛血清 )100mL
兔抗 His 标签多抗，HRP 标记100μL
二甲基亚砜100mL
长效期 SDS-PAGE 还原剂10mL
120668E-10.5mLDNA 离心超滤管 (300-500 KD)1个
海肾荧光素酶报告基因检测试剂盒100 次
加拿大树胶100mL
非冻型血液 RNA 保存液100mL
口腔拭子 ( 医用简装 ) 20只/袋