土壤漆酶微量法测试盒公司各类热销产品大鼠Ⅳ型前胶原肽(PⅣNP)elisa检测试剂盒
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【友情提示】：本产品仅供科研研究使用，不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失，请仔细阅读购买说明！
产品名称：土壤漆酶微量法测试盒
规格 : 100管/48样
测试方法: 微量法
货号：GOY-01S6867
分类：土壤系列
商品介绍：
漆酶（Laccase）是一种含铜的多酚氧化酶，属于铜蓝氧化酶家族，广泛分布于真菌和高等植物中，具有较强的氧化还原能力，在纸浆生物漂白，环境污染物降解和木质纤维素降解以及生物检测方面有非常广泛的应用。

测定原理

漆酶分解底物ABTS产生ABTS自由基，在420nm处的吸光系数远大于底物ABTS，测定ABTS自由基的增加速率，可计算得漆酶活性。

自备实验用品及仪器

天平、常温离心机、可见分光光度计、微量石英比色皿、震荡仪。
试剂的组成和配制
提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入40mL试剂四充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂二：液体18μL×1瓶，4℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入2.5mL蒸馏水充分溶解待用，用不完的试剂4℃保存；
试剂四：液体50mL×1瓶， 4℃保存；
测定步骤
1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、 将试剂一、二、三37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)预热10分钟。
3、 加样表：

样本的前处理
①总FBP酶提取：建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一，冰浴匀浆后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定。
②胞浆和叶绿体FBP酶的分离：按照植物组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5～10的比例（建议称取约0.1g样本，加入1mL提取液一），冰浴匀浆后于4℃，200g离心5min，弃沉淀，取上清在4℃，8000g离心10min，取上清用于测定胞浆FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震荡溶解后超声破碎（冰浴，200W，破碎3s，间歇7s，总时间1min），然后4℃，8000g离心10min，取上清测定叶绿体中FBP酶活性。
建议测定总FBP酶活性，按照步骤①提取粗酶液，若需要分别测定胞浆和叶绿体中的FBP，则按照步骤②提取粗酶液。
环腺苷酸应答元件结合蛋白H抗体     糖代谢相关蛋白1抗体

钙离子通道a1F亚型抗体     唐氏综合征细胞粘附分子抗体

钙调0酸酶B亚基B1抗体     碳酸氢协同转运蛋白4-A7抗体

钙调蛋白激酶激酶α抗体CaMKKα     碳酸氢协同转运蛋白4-A4突变型抗体

透明质酸结合蛋白1抗体     碳酸氢协同转运蛋白4-A4抗体
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土壤漆酶微量法测试盒LPS(TLR4 激活剂 )0.5mg  ATP 溶液，100mM0.25mL

LY294002(PI3K 抑制剂 )1mg  APMSF 溶液，10mg/mL1mL

Metformin(LKB1-AMPK 激活剂 )1g  AP 标记的抗抗体10μL

MG-132(Proteasome 抑制剂 )1mg  AMV cDNA 第一链合成试剂盒30 次

Monensin ( 蛋白转运抑制剂 )100mg  Aminoally-dUTP 溶液，10mM100μL
FBP活性计算：
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每g组织每分钟生成1 nmol的NADPH定义为一个酶活力单位。
FBP（nmol/min/g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(W ×V样÷V样总) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.1 mL；V样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，5 min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g。