细胞毒理试验原理新的药物、化妆品、食品添加剂等在投放市场之前，都必须进行大量的肿瘤细胞毒性试验。细胞毒性主要包括杀死细胞、杀伤细胞、细胞新陈代谢发生改变等机理，表现为细胞凋亡、细胞坏死、细胞生长繁殖抑制等现象。细胞毒性试验中，除了观察测定上述现象外，还可以采集培养细胞在药物处理前后的代谢变化指标，如对处理细胞和对照细胞的DNA、RNA、蛋白质、多肽等特定种类和含量进行测定。用于抗肿瘤药物与肿瘤细胞株系的体外试验时，可以属于细胞药理试验。如果针对某些抗肿瘤药物是否对正常体细胞有...

ATCC细胞培养基操作技术分析1.准备一个培养瓶，加入适宜细胞培养的培养基，液体体积按照说明书的推荐配置，并平衡培养基的温度和pH（CO2）。2.在37℃水浴中或ATCC细胞的正常生长温度下将冻存管轻轻摇动。解冻要快，约2分钟或直到冰晶融化即可。3.从水浴中取出冻存管并用浸泡或喷洒70%乙醇的方式来消毒。进一步的操作均需在无菌操作台中严格无菌条件下进行。4.拧开冻存管的管帽并将内容物转移到一个含有9ml推荐培养基的无菌离心管中。通过温和离心（125×g10min）除去冷冻保护...

细胞分化的特点主要可以概括成三点①持久性:干细胞分化贯穿于生物体整个生命进程中,在胚胎期达到zui大程度②普遍性:生物界普遍存在,是生物个体发育的基础③稳定性和不可逆性:一般来说,分化了的细胞将一直保持分化后的状态,直到死亡正常情况下，细胞分化是稳定、不可逆的。一旦细胞受到某种刺激发生变化，开始向某一方向分化后，即使v引起变化的刺激不再存在，分化仍能进行，并可通过细胞分裂不断继续下去。但大量科学实验证明，在植物细胞中高度分化的植物细胞仍具有发育成完整植株的能力，即植物细胞的性...

流式干细胞实验中荧光染料如何选择（1）确定荧光染料本身所适合的流式干细胞仪，需要了解染料的激发波长和发射波长、仪器所配制的检测滤光片和激发光源。（2）了解荧光素的相对荧光强度：相对荧光强度反映的是荧光素-单抗结合物的亮度，其判断标准是染色指数。影响相对荧光强度的因素包括：不同仪器的激光及滤片组合不同，荧光素的相对荧光强度不同；抗体上荧光素分子的多少会影响相对的荧光强度。（3）选择原则：考虑抗原的密度【高密度表达的抗原可考虑选择几乎所有的荧光素；低密度表达的抗原需要可提供较高S...

如何识别细胞是属于哪种生物污染ATCC细胞培养中常见的生物污染类型有7种，分别是细菌污染、支原体污染、原虫污染、黑胶虫污染、真菌污染、病毒污染以及非细胞污染。他们在细胞培养中污染的特点如下：1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。2、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤...

细胞有机物中主要由几大类分子所组成（一）糖类干细胞中的糖类既有单糖，也有多糖。细胞中的单糖是作为能源以及与糖有关的化合物的原料存在。重要的单糖为五碳糖（戊糖）和六碳糖（己糖），其中zui主要的五碳糖为核糖，zui重要的六碳糖为葡萄糖。葡萄糖不仅是能量代谢的关键单糖，而且是构成多糖的主要单体。多糖在细胞结构成分中占有主要的地位。细胞中的多糖基本上可分为两类：一类是营养储备多糖；另一类是结构多糖。作为食物储备的多糖主要有两种，在植物细胞中为淀粉（starch），在动物细胞中为糖元...

检测干细胞四唑盐比色法试验原理此法的原理是：活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物，并沉积在细胞中，而干细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的蓝紫色结晶物，用酶联免疫检测，以在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反应活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。●0.25%胰蛋白酶消化细胞使其成为单细胞，用含0.1%胎牛血清的RPMI培养基配成1x10^9个/L的但细胞悬液，将细胞接种于96孔培养板中，每孔...

肿瘤细胞培养的冻存和注意事项1.肿瘤细胞应遵守慢冻快融的原则。先将水浴锅调至37-37。5度，取出冻存的细胞迅速放入后将细胞面浸至水面以下不断摇动至融化。2.在无菌台内将*培养基加入50ml的小培养瓶内，约5ml左右，然后用无菌吸管从冻存管内取出细胞，置培养并内轻轻摇晃，使细胞均匀后置培养箱内培养3.将贴壁细胞消化后离心收集，悬浮细胞直接离心收集，以*培养基或胎牛血清重悬细胞至终浓度约106/ml。加入10%的DMSO。以每管1～2ml分装至冻存管中。用绝热材料包裹置-70摄...

肿瘤细胞的结构和繁殖肿瘤细胞通常很小，需用显微镜才能见到，但也有肉眼可见的大型卵细胞。细胞的形状因其生长、分化和功能的不同而有很大变化，有卵圆形、柱形、鳞形、梭形、树枝形等。真核细胞的构造主要可分为细胞核、细胞质和细胞膜三部分。细胞膜之内的生活物质包括细胞核和细胞质统称为原生质。活细胞的化学组成主要是水，约占90%，其余为蛋白质、核酸、脂类、糖类以及少量无机物质。在细胞质中有一些称为细胞器的结构，如线粒体、溶酶体、高尔基体、内质网等。植物细胞和动物细胞相比稍有不同，植物细胞外...

培养基基础培养基绝大多数是建立在平衡盐溶液（BSS）基础上，添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。zui广泛应用的基础培养基是MEM，其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。目前科研市场经典的培养基有很多种，其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是应用zui广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于ATCC细胞的培养。1.MEM是由基础培养基(BME)发展而来的，其中增加了组分的范围及浓度。2.改良的基础培养基培养基也就是我...